Государственная фармакопея Республики Беларусь -
Скачать (прямая ссылка):
- состоянию производственной среды;
- персоналу;
- критическим поверхностям;
- стерилизации контейнеров/укупорочных средств и передаточным процедурам;
- предельному времени хранения лекарственного средства до наполнения контейнера.
Валидация процесса включает надлежащую проверку всего вышеперечисленного, а также систематический контроль при помощи имитационных испытаний с использованием питательной среды, которую инкубируют и исследуют на наличие микробного загрязнения (испытания на заполнение питательными средами). Кроме того, перед выпуском серии любого лекарственного средства, простерилизованного методом фильтрации/или изготовленного в асептических условиях, следует проводить испытание на стерильность для соответствующего количества образцов (2.6.1).
5.1.2. БИОЛОГИЧЕСКИЕ ИНДИКАТОРЫ СТЕРИЛИЗАЦИИ
Биологические индикаторы представляют собой стандартизованные препараты определенных микроорганизмов, используемые для оценки эффективности процедуры стерилизации. Они обычно представляют собой популяцию спор бактерий, нанесенных на инертный носитель, например, на полоску фильтровальной бумаги, стеклянную пластинку или пластиковую пробирку. Инокулированный носитель изолируют таким образом, чтобы предотвратить его повреждение или загрязнение, но в то же время обеспечить контакт стерилизующего агента с микроорганизмами. Суспензии спор могут находиться в герметично закрытых ампулах. Биологические индикаторы готовят таким образом, чтобы существовала возможность их хранения при определенных условиях, при этом должен быть указан срок годности.
Микроорганизмы того же вида, что и бактерии, используемые в производстве биологических индикаторов, могут инокулироваться непосредственно в жидкий продукт, предназначенный для стерилизации, или в жидкий продукт, аналогичный тому, который предназначен для стерилизации. В этом случае необходимо доказать, что жидкий продукт не оказывает ингибирующего воздействия на используемые споры, особенно на их прорастание.
Биологический индикатор должен иметь следующие характеристики: название вида бактерий, используемых в качестве эталонных микроорганизмов, номер штамма в исходной коллекции, количество жизнеспособных спор, приходящееся на носитель, и величину D. Величина D - параметр стерилизации (продолжительность или поглощенная доза), обеспечивающий снижение числа жизнеспособных микроорганизмов до 10% от исходного числа. Данная величина имеет смысл для точно определенных экспериментальных условий стерилизации. Биологический индикатор может содержать несколько видов бактерии на одном носителе. Должна быть указана информация о необходимой питательной среде и условиях инкубации.
Индикаторы рекомендуется размещать в областях, наименее доступных для стерилизующего агента. Эти области определяют эмпирически или на основании предварительных физических измерений, если это возможно. Можно использовать биологические индикаторы, которые включают ампулу с питательной средой, помещенную в упаковку, защищающую инокулированный носитель.
Выбор тест-микроорганизмов для биологических индикаторов должен проводиться с учетом следующих требований:
(а) сопротивляемость тест-штамма конкретному методу стерилизации должна быть высокой по сравнению с сопротивляемостью всех патогенных микроорганизмов и сопротивляемостью микроорганизмов, потенциально контаминирующих продукт;
(б) тест-штамм не должен быть патогенным;
(в) тест-штамм должен легко культивировать.
Наличие после инкубации роста эталонных микроорганизмов, подвергшихся процедуре стерилизации, говорит о том, что эта процедура неудовлетворительна.
Паровая стерилизация. Для валидации циклов стерилизации рекомендуется использование биологических индикаторов, предназначенных для стерилизации паром. Рекомендуются споры Bacillus stearothermophilus (например, ATCC 7953, NCTC 10007, NCIMB 8157 или CIP 52.81). Число жизнеспособных спор должно превышать 5-105 на носитель. Величина D при температуре 121°С должна составлять более 1,5 мин. При обработке биологических индикаторов паром при температуре (121±1)°С в течение 6 мин должно наблюдаться сохранение жизнеспособных спор, а обработка при той же температуре в течение 15 мин должна приводить к полной гибели эталонных тест-микроорганизмов.
Сухожаровая стерилизация. Для приготовления биологических индикаторов рекомендованы споры Bacillus subtilis (например, var. niger ATCC 9372, NClMB 8058 или CIP 77.18). Число жизнеспособных спор должно быть более 1105 на носитель. Величина D при температуре 160°С должна составлять 1-3 мин. Для стерилизации и депирогенизации стеклянной посуды часто используется горячий воздух при температуре более 220°С. В этом случае в качестве замены биологическим индикаторам может быть доказано снижение термостойких бактериальных эндотоксинов на три порядка.
Радиационная стерилизация. Биологические индикаторы могут применяться для мониторинга текущих операций в качестве дополнительной возможности оценки эффективности установленной дозы излучения, особенно в случае стерилизации ускоренными электронами. Рекомендуются споры Bacillus pumilus (например, ATCC 27.142, NCTC 10327, NCIMB 10692 или CIP 77.25). Число жизнеспособных спор должно быть более 1107 на носитель. Величина D должна составлять более 1,9 кГр. Необходимо убедиться, что после облучения биологического индикатора дозой 25 кГр (минимальная поглощенная доза), не наблюдается роста эталонных микроорганизмов.
